כיצד להקפיא יבש יבשתי תרבות חיידקים (Lyophilization)

הקפאת ייבוש, המכונה גם lyophilization או cryodesiccation, הוא תהליך של הסרת מים ממוצר לאחר הקפאה (ולאחר מכן להציב תחת ואקום) המאפשר קרח לשנות מן מוצק לאדים, מבלי לעבור שלב נוזלי. קרח (או ממיסים קפואים אחרים) מוסרים ממוצר באמצעות תהליך של סובלימציה ומולקולות מים מחוברים מוסרים בתהליך של desorption.

- <->

היסודות של Lyophilization

אחת הדרכים הטובות ביותר לאחסן חיידקים, פטרייתיים, שמרים או תרבות מיקרואורגניזם אחרים לתקופות ארוכות של זמן היא להשתמש בתהליך של הקפאת ייבוש. זה הליך מעבדה קצר יכול להתבצע עם כל זמין מסחרית להקפיא- dry זה ישמור על אוסף התרבות שלך. בגלל lyophilization הוא הצורה המורכבת והיקרה ביותר של ייבוש, התהליך הוא מוגבל בדרך כלל עדין, חום רגיש חומרים בעלי ערך גבוה. חומרים שאינם פגומים על ידי הקפאה בדרך כלל ניתן lyophilized כך אחסון קירור מיותר.

תהליך זה יכול לקחת כמו שלוש שעות, וכל עוד 24 שעות, לא כולל זמן הצמיחה התרבות.

שלב אחר שלב תהליך Lyophilization

ראשית, לגדול תרבות לילה, או הדשא, של מיקרואורגניזם על LB או צלחת אגר מזין המתאים אחרים.

1. לאחר מכן, להכין בקבוקי צנצנת סטרילית סטרילית על ידי מעוקר מראש, עם כובעים (פקקים גומי) להציב על גבי הדף. נייר תוויות נייר מודפס עם הזיהוי של התרבות בתוך הצינורות לפני החיטוי. לחלופין, להשתמש בצינורות עם כובעים המיועדים סטריליות.

2. הוסף 4 למאגר lyophilization מ"ל על הצלחת. במידת הצורך, התאים ניתן להשעות באמצעות מוט זכוכית סטרילית.

3. להעביר במהירות את ההשעיה תרבות על בקבוקונים מעוקרים. מוסיפים כ 1. 5 מ"ל לכל בקבוקון. חותם עם כובע הגומי.

4. להקפיא את ההשעיה התרבות בתוך בקבוקונים על ידי הנחת צלוחיות ב -20 מעלות מקפיא Celcius. לאחר שהתרבויות קפואות, הכינו את המקפיא על ידי הפעלתו ומאפשרות זמן לטמפרטורה ולתנאי ואקום המתאימים לייצוב. בצע זאת בהתאם להוראות היצרן עבור המותג הספציפי של מייבש הקפאה שבו אתה משתמש.

5. בזהירות, ובאופן aseptically, במקום את הכדורים בקבוקון על גבי צלוחיות, כך לחות יכול להימלט במהלך תהליך הייבוש להקפיא, ומניחים את צלוחיות לתוך תא מייבש מקרר. החל את הוואקום לתא בהתאם להוראות היצרן.

6. לאפשר זמן תרבות lyophilize לחלוטין (להתייבש). זה עשוי להימשך בין כמה שעות עד הלילה בהתאם לנפח של כל מדגם וכמה דוגמאות יש לך.

7. הסר את הדגימות מחדר מייבש הקפאה על פי הוראות היצרן וחתם מיד את הבקבוקים עם כובעי הגומי, ולאחר מכן את צמרות הסריג.

8. חנות אוסף lyophilized תרבות בטמפרטורת החדר.

9. מוצרים שתצטרך

10. מקפיא-מייבש

מזין או צלחות אגר מתאימות אחרות (ואינקובטור לגידול תרבות)

• מוט זכוכית
• חיץ ליופיליזציה
• בקבוקונים עם צנצנות גומי (ו crimper כדי להחיל את הכובעים)
• מקפיא
• הפניה:
• SP Scientific. עקרונות יסוד של ייבוש ההקפאה. // www. spspcientific. com / freeze-drying-lyophilization-basics /