איך לעשות מאגר TAE בכמה שלבים

חיץ TAE הוא פתרון המורכב בסיס Tris, חומצה אצטית EDTA (Tris-acetate-EDTA). זה היסטורית המאגר הנפוץ ביותר המשמש agorose ג'ל אלקטרופורזה בניתוחים של מוצרי דנ"א הנובע הגברה PCR, פרוטוקולי טיהור DNA או ניסויים שיבוט DNA.

למאגר זה יש כוח יוני נמוך ויכולת חציצה נמוכה. זה מתאים במיוחד אלקטרופורזה של גדול (> 20 KB) חתיכות של DNA ויהיה צורך להחליף לעתים קרובות או recirculated במשך יותר (4 שעות) ג 'ל לרוץ פעמים.

עם זאת בחשבון, ייתכן שתרצה לשקול כמה אצוות של המאגר.

בהתחשב בכך המאגר קל לעשות את הצעדים ניתן לבצע במהירות, ביצוע יותר אצווה אחת בכל פעם לא צריך להיות זמן רב במיוחד או קשה לשלוף. באמצעות ההוראות שלהלן, זה צריך לקחת רק 30 דקות כדי להפוך את מאגר TAE. כך:

הכנת פתרון צילומים של EDTA

פתרון EDTA (אתילנדיאמין tetraacetic חומצה) מוכן מראש. EDTA לא ילך לחלוטין לפתרון עד ה- pH מותאם עד כ 0. 0. עבור פתרון מלאי 500 מיליליטר של 0. 5 M EDTA, לשקול את 93. 05 גרם של מלח EDTA דיסודיום (FW = 372 2 ). ממיסים במים 400-milliler deionized ולהתאים את ה- pH עם hydroxide נתרן (NaOH). למעלה את הפתרון נפח סופי של 500 milliliters.

-> <->

להעיף פתרון צילומים של TAE

הפוך פתרון מרוכז (50x) מלאי של TAE על ידי שקילה של 242 גרם של בסיס Tris (FW = 121. 14) ו המסת זה כ 750 מיליליטר של מים מאויישים.

בזהירות הוסף 57. 1 מיליליטר של חומצה קרחונית ו 100 מיליליטר של 0. 5 M EDTA (pH 8. 0). לאחר מכן, להתאים את הפתרון נפח סופי של 1 ליטר. פתרון זה מלאי ניתן לאחסן בטמפרטורת החדר. ה- pH של מאגר זה אינו מותאם והוא צריך להיות על 8. 5.

הכן פתרון עבודה של TAE

הפתרון עובד של חיץ 1X TAE נעשה על ידי פשוט דילול הפתרון המניה על ידי 50x במים deionized.

ריכוז סופי המומס הם 40 מ"מ. טריס אצטט ו 1 מ"מ EDTA. המאגר הוא כעת מוכן לשימוש בניהול agarose ג'ל.

מה שאתה צריך עבור המאגר

מאז ביצוע מאגר TAE רק דורש סדרה מהירה ופשוטה של ​​הוראות, כמות החומרים הדרושים זה לא מוגזם. אתה רק צריך EDTA דיסודיום מלח, בסיס Tris, חומצה אצטית קרחוני.

הפיכת המאגר גם דורש מטר pH ו סטנדרטים כיול, לפי הצורך. אתה גם צריך 600 milliliter ו 1500 milliliters כוסות או צלוחיות וכן צילינדרים מדורגים. לבסוף, תצטרך מים deionized, מערבבים בארים, ומערבבים צלחות.

גלישת למעלה

היכן בכוונתך להפוך את המאגר - באתר בית ספר, באתר עבודה או במיקום אחר, כגון הבית שלך?בדוק את המלאי לפני שתתחיל לוודא שיש לך את כל החומרים הנ"ל למאגר TAE.

אם אתה מעדיף לא לשלם עבור חומרים, בוחרים לעשות את המאגר מחוץ לבית שלך מומלץ. אתה יכול בקלות להזמין את החומרים שאתה צריך באינטרנט או לבקר בחנות המומחיות עבורם.